价格：7000
货号：05-442-1B
规格：100ml
产品名称：MSCgo™ Rapid Osteogenic Differentiation Medium
间充质干细胞成骨快速诱导分化试剂
【产品介绍】
MSCgo™ Osteogenic Differentiat Medium间质干细胞成骨诱导分化培养基，无血清，
无异源，即用型完全培养基，诱导hMSC分化为成熟成骨细胞。适用于不同来源的hMSC，
如骨髓、脂肪组织和脐带组织（hMSC-BM，hMSC-AT，hMSC-CT）。
MSCgo™ 快速成骨分化介质 10天以内快速诱导成骨，而MSCgo™ 成骨分化介质需要14-21天。
成骨结果
hMSC分化成骨后会矿化形成钙结节且有钙分泌，所以可以利用茜素红S （Alizarin Red S） 染色检视分化的成骨细胞。
不同的细胞来源（类型、年龄、代数）所得到的分化效果会有差异
成骨实验所需材料
维持培养基
营养棒 XF 培养基： BI®；05-200-1，05-201-1
MSC 附件解决方案 XF： BI;05-752-1，05-760-1
注：若是血清体系、血小板体系或其他MSC培养体系也可以使用。
分化培养基
间充™质成骨分化介质：BI;05-440-1
MSCgo™ 快速成骨分化培养基：BI;05-442-1
染色试剂
建议使用Vivacell品牌，间充质干细胞成骨分化染色试剂盒，货号：C37C0-0150。
成骨诱导分化操作
1 .接种hMSC：用MSC 附件解决方案 （BI;P/N： 05-752-1，1：100 DPBS 稀释） 预包被24孔盘，
每孔加入0.5ml MSC NutriStem XF，接种6x10®4细胞 （3x104细胞/厘米2)。
此处仅为针对成骨诱导的细胞接种操作，MSC NutriStem XF Medium详细操作步骤请参考其说明书。®
若使用血清体系、血小板体系或其他MSC培养体系，可以略过包被步骤。
阿拉伯数字 置于37°C，5%2细胞培养箱中培养。
以成骨分化培养基诱导分化
1 培养24h后确认细胞融合度达到80-90%，将维持培养基吸除，每孔（24孔盘）加入0.5ml分化培养基。
若细胞融合度<80%，继续再培养一天。
阿拉伯数字 置于37°C，5%2培养箱中培养10-21天，每2-3天换液。
培养时间越长，会有越多矿化的细胞，ARS染色更明显。
3 成骨评价：使用2%的ARS染色液。
染色步骤
间充质干细胞成骨分化染色试剂盒 英文名称：MSC Osteo-Staining
【预期用途】
适用于间充质干细胞成骨分化后的骨细胞染色，尤其适合作为BI MSCgo断续器成骨XF（ BI 05-440-1B 或 05-442-1B）
成骨分化后的染色验证之用。
【检验原理】
茜素红S （Alizarin Red S）是一种常用的示钙染剂，广泛用作生物医学样本中含钙目标物的染色检验。
游离的钙离子可与茜素红S形成红色沉淀；固着的钙则会被直接染成红色。
在成骨诱导分化作用下，间充质干细胞 （MSC， Mesenchymal Stem Cell） 会被逐渐分化为骨细胞（Osteoblasts），
包括钙化骨节（钙盐结晶体）的形成 （钙结节形成） 和细胞的钙泌反应 （钙分泌）。两者均可被茜素红S染成红色。
【检验方法】
以操作一个T25 flask为例：
1. 吸弃分化培养基，加入1 ml DPBS （BI 02-023-1ACS） 轻轻润洗培养瓶底面。
2. 吸弃DPBS，加入3毫升固定液（C37C10020），轻轻晃动培养瓶，使底面浸润均匀。室温下静置30 分钟。
3. 吸弃修复液;加入3 ml Wash I （C37C20050），润洗细胞2-3次。
4. 吸弃Wash I，加入3 ml 染色液 （C37C30020），底面浸润均匀，室温染色30分钟。5. 吸弃染色液，加入3 ml Wash II
（C37C40050），润洗细胞2-3次。
6. 吸弃Wash II，加入1 ml Inspection Solution （C37C50010），置于显微镜下观察、拍照 （分化后的骨细胞会被染成橘红色）。
【检验结果的解释】
在显微镜下，可观察到钙化骨节与茜素红染料结合后呈现红色或橘红色(如下图所示)。被染色细胞的数量和染色的深度会受到
多种因素的影响，例如：细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。
说明书下载：
6380671794986575706272865.pdf